第二节 微生物纯培养物的选择新同步练习
一、选择题
粗饲料经过微生物发酵后，其富含的纤维素、半纤维素和果胶等物质被降解为小分子。易于被畜禽采食和消化吸收，用于饲料发酵的益生菌包括乳酸菌和酵母菌等。生产发酵饲料的大致过程：将适量粗饲料、益生菌和清水等拌匀，放入发酵池或容器中，然后密封发醉，已知乳酸菌产生的乳酸能溶解碳酸钙，以下相关说法正确的是（ ）
A.
发酵过程中粗饲料可为益生菌的生长提供碳源
B.
酵池应该留有排气口，防止乳酸菌发酵产生大量气体导致爆炸
C.
酵母菌和乳酸菌在发酵液中的位置不同。酵母菌偏向上层
D.
可用含有碳酸钙的鉴别培养基，并根据透明圈初步筛选出益生菌中的乳酸菌
我要多选
作答：
答对了
答错了
某种微生物在同一环境中抑制其他种类微生物生长繁殖的现象称为生物拮抗。为探究菌株甲对病原菌I、Ⅱ、Ⅲ生长的拮抗效果，研究者取病原菌涂布接种在平板上，在距离中央3cm处用接种环分别在4个位点接种菌株甲，28℃培养3~5天，观察抑菌圈大小，实验结果如图。有关叙述错误的是（ ）
A.
病原菌I、Ⅱ、Ⅲ需在适宜的环境中培养
B.
菌株甲在各组培养基中都能正常生长
C.
菌株甲对病原菌Ⅰ的抑制作用最强
D.
菌株甲可能通过释放分泌物抑制病原菌生长
我要多选
作答：
答对了
答错了
某化工厂的污水池中含有一种有害且难以降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素等配制的培养基，成功筛选到能高效降解化合物A的细菌（目的菌），实验主要步骤如图所示。有关分析错误 的是（ ）
A.
以A作为唯一碳源，是为了筛选出可降解化合物A的异养微生物
B.
振荡培养后，应选择A含量显著降低的培养液，接入新的培养液中连续培养
C.
将目的菌接种到固体培养基上，可用稀释涂布平板法或平板划线法
D.
通过基因改造也能获得目的菌，两种方法获得的目的菌均可直接用于生产实践
我要多选
作答：
答对了
答错了
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验中，首先要进行土壤取样。下列关于土壤取样的叙述，错误的是（ ）
A.
土壤取样，应选取肥沃、湿润的土壤
B.
先铲去表层土，在3～8cm深处取样
C.
取样用的小铁铲和信封在使用前不用灭菌
D.
应在火焰旁称取土壤
我要多选
作答：
答对了
答错了
穿心莲内酯为穿心莲中具有抗菌消炎作用的活性成分，临床上用于治疗菌痢、脑膜炎等。为探究不同浓度的穿心莲内酯对甲、乙、丙三种痢疾杆菌的杀菌效果，某研究小组将等量的甲、乙、丙三种痢疾杆菌分别用无菌水制备成菌悬液，在固体培养基上制成含菌培养皿， 在含菌培养皿上放置经不同浓度穿心莲内酯浸泡过的滤纸片，培养一段时间后，测定三种细菌的抑菌圈直径并取平均值，结果如表。下列说法错误的是（ ）
| 组别 | 1% | 5% | 10% | 15% | 20% |
| 甲菌种抑菌圈直径 | 2.5mm | 3.0mm | 3.5mm | 4mm | 5.0mm |
| 乙菌种抑菌圈直径 | 1.6mm | 1.7mm | 1.9mm | 2.1mm | 2.5mm |
| 丙菌种抑菌圈直径 | 2.2mm | 2.7mm | 3.lmm | 3.5mm | 4.0mm |
A.
培养皿可采用干热灭菌法进行灭菌，制备含菌培养皿时应使用稀释涂布平板法
B.
不同浓度的穿心莲内酯对三种痢疾杆菌都有抑制作用，抑菌效果大小为乙>丙>甲
C.
若长期使用含穿心莲内酯的药物，则三种痢疾杆菌种群的耐药基因频率可能会增大
D.
本实验还需设计在含菌培养皿上放置未用穿心莲内酯浸泡过的滤纸片作为对照
我要多选
作答：
答对了
答错了
下列关于“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验操作的叙述，正确的是（ ）
A.
选择菌落数为30~300的实验组平板进行计数
B.
将实验组和对照组平板倒置，放在25℃恒温培养箱中培养
C.
利用稀释涂布平板法准确估计菌落数目的关键是恰当的稀释度
D.
判断选择培养基是否起选择作用，需设置接种的普通培养基作为对照
我要多选
作答：
答对了
答错了
幽门螺杆菌（Hp）尿素呼气试验是用同位素标记的尿素做呼气试验检测幽门螺杆菌感染的方法，其原理为利用幽门螺杆菌有活性很高的脲酶这一特点。在患者体内采集样本并制成菌液后，按如下步骤进行分离培养，下列叙述错误的一项是（ ）
A.
在培养过程需将培养皿倒置，若不倒置培养，将导致无法形成单菌落
B.
在培养基加入尿素和酚红指示剂，这是因为Hp含有脲酶，它能以尿素作为氮源；若有Hp，则菌落变黑
C.
Hp能将14C标记的尿素分解为NH3和14CO2，临床上用14C呼气试验检测人体是否感染Hp
D.
在无菌条件下操作时，待平板冷凝后先将菌液稀释，然后将菌液涂布到培养基平面上，菌液稀释的目的是为了获得单菌落
我要多选
作答：
答对了
答错了
温泉中含有能够分解淀粉的耐热古细菌，在固体培养基中，该类细菌分解淀粉会形成透明圈。下图表示筛选能高效产生淀粉酶的耐热古细菌的过程，有关叙述正确的是（ ）
A.
②过程是利用稀释涂布平板分离并筛选古细菌
B.
配制Ⅰ号培养基时需要加入琼脂，先调节pH再灭菌
C.
为防止污染需要对Ⅰ号、Ⅱ号培养基及培养皿进行干热灭菌
D.
从Ⅰ号培养基中选择透明圈最小的菌落接种到Ⅱ号培养基
我要多选
作答：
答对了
答错了
研究发现圆褐固氮菌和芽孢杆菌组合可以将某类厨余垃圾有效降解。为制备能有效分解该类厨余垃圾的微生物菌剂，科研小组对两菌种进行了最佳接种量比的探究实验，实验结果如下图。下列叙述正确的是（ ）
A.
该实验的接种方法为平板划线法
B.
该类厨余垃圾可作为圆褐固氮菌扩大培养的培养基
C.
处理该类厨余垃圾，两菌种的最佳接种量比为2：1
D.
圆褐固氮菌的某些代谢产物可促进巨大芽孢杆菌的增殖
我要多选
作答：
答对了
答错了
利用“抗生素纸片扩散法”观察某细菌在含有抗生素的培养基上的生长状况，可探究抗生素对细菌的选择作用。下列关于该实验的说法错误的是（ ）
A.
实验中应将不含抗生素的纸片和抗生素纸片分别放置在培养基的不同区域
B.
实验中可以通过抑菌圈的大小来判定抗生素的抑菌效果
C.
从抑菌圈边缘的菌落上挑取细菌继续培养，连续选择几代后抑菌圈的直径会变大
D.
细菌耐药性的变异是在使用抗生素之后产生的
我要多选
作答：
答对了
答错了
二、综合题
苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中，对环境有严重危害。小明同学准备依据图1所示操作步骤，从处理废水的活性污泥中分离筛选酚降解高效菌株。请回答下列问题：
(1)将采集到的样品接种培养，苯酚用量应随转接次数增加而逐渐_____ ，以达到富集酚降解菌的目的。
(2)若上图平板中菌落过于密集，应进一步_____ ，以便于菌落计数与分离。制备平板培养基时除了需要水、营养物质外，还必须添加_____ 。
(1)将采集到的样品接种培养，苯酚用量应随转接次数增加而逐渐
(2)若上图平板中菌落过于密集，应进一步
我要多选
作答：
答对了
答错了
尿素[CO（NH2）2]是农业生产上一种重要的氮肥，但是不能被农作物直接吸收，土壤中的某些细菌能合成脲酶，可以将尿素分解成氨和CO2，然后被植物利用。为分离和培养土壤中能分解尿素的细菌，某实验小组要完成活动“从土壤中分离出能分解尿素的细菌”，部分操作过程如图。回答下列问题：
(1)在该实验活动中，配制培养基需要以________ 为唯一氮源，还需要添加葡萄糖，原因是________ ，配制该培养基需要采用________________________ 法灭菌。
(2)在接种前需要对样品进行稀释处理，以保证获得菌落数在30~300个、适于计数的平板。该实验活动一般选用104、105、106倍的稀释液进行平板培养，若测定放线菌数量，则需要采用与此不一样的稀释倍数，原因是________________ 。
(3)在进行实验时，甲同学从对应106倍稀释的培养基中筛选出大约200个菌落，但是其他同学在同样稀释度下只筛选出大约90个菌落。若甲同学的结果有问题，则可能的原因是________________ （答出一项即可）。若培养时观察到培养基上的菌落连成一片，则最可能的原因是________________ 。
(4)测定能分解尿素的细菌的数量可以借助________________ 直接计数，这种方法得到的结果一般比用稀释涂布平板法得到的结果________ （填“偏大”或“偏小”）。
(1)在该实验活动中，配制培养基需要以
(2)在接种前需要对样品进行稀释处理，以保证获得菌落数在30~300个、适于计数的平板。该实验活动一般选用104、105、106倍的稀释液进行平板培养，若测定放线菌数量，则需要采用与此不一样的稀释倍数，原因是
(3)在进行实验时，甲同学从对应106倍稀释的培养基中筛选出大约200个菌落，但是其他同学在同样稀释度下只筛选出大约90个菌落。若甲同学的结果有问题，则可能的原因是
(4)测定能分解尿素的细菌的数量可以借助
我要多选
作答：
答对了
答错了
化合物S被广泛应用于医药、食品和化工工业﹐用菌株C可生产S，S的产量与菌株C培养所利用的碳源关系密切。某小组通过实验比较不同碳源对菌体生长和S产量的影响，结果见下表。请回答下列问题：
(1)实验室培养微生物时，需要对所需的玻璃器皿进行灭菌，灭菌的方法是_____ 。
(2)菌株C的生长除需要碳源外，还需要_____ （答出2点即可）等营养物质。
(3)由实验结果分析可知，菌株C生长的最适碳源是_____ ；用菌株C生产S的最适碳源是_____ ；碳源为淀粉时菌株C不能生长，推测可能原因是_____ 。
(4)若以制糖废液作为碳源﹐为进一步确定生产S的最适碳源浓度﹐该小组进行了相关后续实验。请简要写出实验思路：_____ 。
| 碳源 | 细胞干重（g/L） | S产量（g/L） |
| 葡萄糖 | 3．12 | 0．15 |
| 淀粉 | 0．01 | 0．00 |
| 制糖废液 | 2．30 | 0．18 |
(1)实验室培养微生物时，需要对所需的玻璃器皿进行灭菌，灭菌的方法是
(2)菌株C的生长除需要碳源外，还需要
(3)由实验结果分析可知，菌株C生长的最适碳源是
(4)若以制糖废液作为碳源﹐为进一步确定生产S的最适碳源浓度﹐该小组进行了相关后续实验。请简要写出实验思路：
我要多选
作答：
答对了
答错了
某种物质S（一种含有C、H、N的有机物）难以降解，会对环境造成污染，只有某些细菌能降解S。研究人员按照下图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解S的细菌菌株。实验过程中需要甲、乙两种培养基，甲的组分为无机盐、水和S，乙的组分为无机盐、水、S和Y。
回答下列问题：
(1)实验时，盛有水或培养基的摇瓶通常采用____ 的方法进行灭菌。甲、乙培养基均属于____ 培养基。
(2)实验中初步估测摇瓶M中细菌细胞数为2×107个/mL，若要在每个平板上涂布0.1mL稀释后的菌液，且保证每个平板上长出的菌落数不超过200个，则至少应将摇瓶M中的菌液稀释____ 倍。
(3)在步骤⑤的筛选过程中，发现当培养基中的S超过某一浓度时，某菌株对S的降解量反而下降，其原因可能是____ 。
(4)对淤泥中能降解S的细菌进行计数，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是____ 。
(5)上述实验中，甲、乙两种培养基所含有的组分虽然不同，但都能为细菌的生长提供4类营养物质，即____ 。
回答下列问题：
(1)实验时，盛有水或培养基的摇瓶通常采用
(2)实验中初步估测摇瓶M中细菌细胞数为2×107个/mL，若要在每个平板上涂布0.1mL稀释后的菌液，且保证每个平板上长出的菌落数不超过200个，则至少应将摇瓶M中的菌液稀释
(3)在步骤⑤的筛选过程中，发现当培养基中的S超过某一浓度时，某菌株对S的降解量反而下降，其原因可能是
(4)对淤泥中能降解S的细菌进行计数，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是
(5)上述实验中，甲、乙两种培养基所含有的组分虽然不同，但都能为细菌的生长提供4类营养物质，即
我要多选
作答：
答对了
答错了
生活中常用的调味料——味精的主要成分为谷氨酸钠。谷氨酸棒状杆菌可用于微生物发酵工程生产谷氨酸，从而制取谷氨酸钠。回答下列问题。
(1)研究发现，谷氨酸棒状杆菌内的谷氨酸脱氢酶直接催化谷氨酸的产生，当谷氨酸棒状杆菌内谷氨酸的浓度升高到一定程度时，会抑制谷氨酸脱氢酶的活性，这种调节方式对微生物的意义是_____________ 。
(2)与酵母菌相比，谷氨酸棒状杆菌在细胞结构上的最主要的区别是_____________ ；谷氨酸发酵的培养基成分有豆饼水解液、玉米浆、尿素、磷酸氢二钾、硫酸镁、生物素等，从物理性质看，该培养基属于_____________ 培养基。
(3)测定谷氨酸棒状杆菌数目可采用的计数方法有显微镜直接计数法和_____________ ，前者计数的结果比后者计数的结果值更_____________ （填“大”或“小”），原因是_____________ 。
(4)谷氨酸棒状杆菌在培养过程中，当培养基中碳氮质量比为4：1时，菌体大量繁殖而产生的谷氨酸少；当碳氮质量比为3：1时，菌体繁殖受抑制，但谷氨酸的合成量大增。根据谷氨酸棒状杆菌这一生理特点，在发酵过程中大量生产谷氨酸的生产设计思路是_____________ 。
(1)研究发现，谷氨酸棒状杆菌内的谷氨酸脱氢酶直接催化谷氨酸的产生，当谷氨酸棒状杆菌内谷氨酸的浓度升高到一定程度时，会抑制谷氨酸脱氢酶的活性，这种调节方式对微生物的意义是
(2)与酵母菌相比，谷氨酸棒状杆菌在细胞结构上的最主要的区别是
(3)测定谷氨酸棒状杆菌数目可采用的计数方法有显微镜直接计数法和
(4)谷氨酸棒状杆菌在培养过程中，当培养基中碳氮质量比为4：1时，菌体大量繁殖而产生的谷氨酸少；当碳氮质量比为3：1时，菌体繁殖受抑制，但谷氨酸的合成量大增。根据谷氨酸棒状杆菌这一生理特点，在发酵过程中大量生产谷氨酸的生产设计思路是
我要多选
作答：
答对了
答错了
醋酸菌是果醋发酵过程中产生醋酸及其风味衍生物的重要微生物，筛选出优良耐受性的高产醋酸菌对提高发酵型果醋的品质具有重要意义。研究人员尝试从腐烂的猕猴桃中筛选出耐高温、耐高醇的高产醋酸菌株。请回答相关问题：
(1)配制分离培养基。成分：葡萄糖、酵母提取物、MgSO4·7H2O、琼脂粉、CaCO3、3%无水乙醇等。
①根据物理性质分类，分离培养基属于____________ 培养基，可采用_____________ 法对培养基进行灭菌。
②培养过程中，醋酸菌产生的醋酸能溶解碳酸钙，形成溶钙圈，便于筛选_____________ 菌株。
③3%无水乙醇的作用是_____________ 。
(2)高产醋酸菌的培养与分离。部分实验目的与具体操作如下表所示，请完成表格。
耐高温、耐高醇醋酸菌的定性与选择。
(3)目的菌株的发酵效果检测。研究人员研究了两种高产耐受性优良的菌株（AS1.41和LO2）果醋发酵过程中产酸量的变化（OD600数值表示菌体密度），结果如下图所示。
据上图分析，该研究的自变量是____________ ，发酵生产中应选用的菌株是_____________ 。
(1)配制分离培养基。成分：葡萄糖、酵母提取物、MgSO4·7H2O、琼脂粉、CaCO3、3%无水乙醇等。
①根据物理性质分类，分离培养基属于
②培养过程中，醋酸菌产生的醋酸能溶解碳酸钙，形成溶钙圈，便于筛选
③3%无水乙醇的作用是
(2)高产醋酸菌的培养与分离。部分实验目的与具体操作如下表所示，请完成表格。
| 实验目的 | 实验简要操作过程 |
| ① | 取腐烂猕猴桃的汁液1mL，放入装有100mL培养液的锥形瓶中适宜条件下培养48h。 |
| 梯度稀释 | 无菌条件下取1mL上述的培养液，加入到② |
| 接种培养 | 取上述各组稀释液0.1mL，分别均匀涂布于无菌培养基的表面，将培养皿③ |
| 分离纯化 | 挑取④ |
| 斜面保藏 | 将菌种接种于斜面保藏培养基中，放入冰箱冷藏。 |
耐高温、耐高醇醋酸菌的定性与选择。
(3)目的菌株的发酵效果检测。研究人员研究了两种高产耐受性优良的菌株（AS1.41和LO2）果醋发酵过程中产酸量的变化（OD600数值表示菌体密度），结果如下图所示。
据上图分析，该研究的自变量是
我要多选
作答：
答对了
答错了
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